ClearLLab 10C - HR - Hrvatska inačica

KOMBINACIJE CE ANTITIJELA ZA ANALIZU LEUKEMIJE / LIMFOMA* P ANELI C LEAR LL AB 10C

KNJIGA SLUČAJEVA

Svaka je stanica važna * samo ne-Hodgkinov limfom

1

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

SADRŽAJ

UVOD......................................................................................3 POZADINA.............................................................................3 OPĆE PREPORUKE ZA IMUNOFENOTIPIZACIJU.........4 NAMJENA PANELA CLEARLLAB 10C.............................4 PANELI CLEARLLAB 10C...................................................4 KOMPLET ZA KOMPENZACIJU CLEARLLAB................5 ODABIR SLUČAJA I INTERPRETACIJA...........................5 POVEZANI DOKUMENTI.....................................................6 REFERENCE...........................................................................6 SLUČAJEVI............................................................................7 NEMA IMUNOFENOTIPSKE ABNORMALNOSTI...........7 PERIFERNA PUNA KRV....................................................7 Slučaj br. 1: Normalna puna krv.................................7 KOŠTANA SRŽ................................................................... 32 Slučaj br. 2: Normalna koštana srž....................... 32 LIMFNI ČVOR.....................................................................56 Slučaj br. 3: Normalni limfni čvor..........................56 NEOPLASTIČKI PROCES PODRIJETLA B-STANICE................................................ 80 B LIMFOBLASTIČNA LEUKEMIJA / LIMFOBLASTIČNI LIMFOM...........................................80 Slučaj br. 4: B akutna limfoblastična leukemija / limfoblastični limfom......................... 80 B LIMFOBLASTIČNA LEUKEMIJA / LIMFOBLASTIČNI LIMFOM......................................... 105 Slučaj br. 5: B akutna limfoblastična leukemija / limfoblastični limfom........................ 105 KRONIČNA LIMFOCITNA LEUKEMIJA / LIMFOM MALIH LIMFOCITA....................................... 130 Slučaj br. 6: Kronična limfocitna leukemija / limfom malih limfocita..................... 130 KRONIČNA LIMFOCITNA LEUKEMIJA / LIMFOM MALIH LIMFOCITA....................................... 154 Slučaj br. 7: Kronična limfocitna leukemija / limfom malih limfocita..................... 154 LIMFOM PLAŠTENIH STANICA..................................178 Slučaj br. 8: Limfom plaštenih stanica...............178 PLAZMASTANIČNI MIJELOM.................................... 202 Slučaj br. 9: Plazmastanični mijelom................ 202 FOLIKULARNI LIMFOM................................................226 Slučaj br. 10: Folikularni limfom.......................... 226

LIMFOM B-STANICA PODRIJETLA IZ GERMINATIVNOG CENTRA...................................... 250 Slučaj br. 11: Limfom B-stanica podrijetla iz germinativnog centra...................250 LIMFOM ZRELIH B-STANICA.....................................274 Slučaj br. 12: Limfom zrelih B-stanica...............274 LIMFOM ZRELIH B-STANICA.................................... 298 Slučaj br. 13: Limfom zrelih B-stanica.............. 298 NEOPLASTIČKI PROCES PODRIJETLA T-STANICE............................................... 322 T LIMFOBLASTIČNA LEUKEMIJA / LIMFOBLASTIČNI LIMFOM.........................................322 Slučaj br. 14: T limfoblastična leukemija / T limfoblastični limfom...................322 T LIMFOBLASTIČNA LEUKEMIJA / LIMFOBLASTIČNI LIMFOM........................................ 346 Slučaj br. 15: T limfoblastična leukemija / T limfoblastični limfom..................346 T VELIKI ZRNASTI LIMFOM...................................... 370 Slučaj br. 16: T-stanična limfoproliferativna bolest...................................... 370 T VELIKI ZRNASTI LIMFOM...................................... 394 Slučaj br. 17: T-stanična limfoproliferativna bolest......................................394 NEOPLASTIČKI PROCES MIJELOIDNOG PODRIJETLA.........................................418 AKUTNA MIJELOIČNA LEUKEMIJA........................ 418 Slučaj br. 18: Akutna mijeloična leukemija...... 418 AKUTNA MIJELOIČNA LEUKEMIJA....................... 442 Slučaj br. 19: Akutna monocitna leukemija....442 AKUTNA MIJELOIČNA LEUKEMIJA....................... 466 Slučaj br. 20: Akutna mijeloična leukemija-NOS............................................................466 AKUTNA MIJELOIČNA LEUKEMIJA.......................490 Slučaj br. 21: Akutna promijelocitna leukemija........................................................................490 AKUTNA MIJELOIČNA LEUKEMIJA........................ 514 Slučaj br. 22: Akutna monocitna leukemija.... 514 MIJELODISPLASTIČNI SINDROM.............................538 Slučaj br. 23: Mijelodisplastični sindrom......... 538 MIJELODISPLASTIČNI SINDROM............................ 562 Slučaj br. 24: Mijelodisplastični sindrom......... 562

Svaka je stanica važna

2

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

UVOD Ova knjiga slučajeva namijenjena je kao pomoć pri analizi podataka o imunofenotipizaciji u protočnoj citometriji generiranih s pomoću panela ClearLLab 10C tvrtke Beckman Coulter s oznakom CE-IVD s reagensom za leukemiju i limfom na protočnim citometrima Navios i Navios EX tvrtke Beckman Coulter. U toj su knjizi navedeni primjeri slučajeva s nalazima tipičnima za razne limfoidne i mijeloidne novotvorine, kao i slučajevi pacijenata s kliničkim i/ili laboratorijskim nalazima koji upućuju na neoplastični proces koji je u tijeku, ali za koje nije utvrđena imunofenotipska abnormalnost. Vrste uzoraka obuhvaćaju perifernu punu krv, koštanu srž i limfne čvorove. Svaki slučaj obuhvaća kliničku vinjetu koja sadrži demografske podatke i anamnezu pacijenta, datoteke s listmode podacima specifične za slučaj koje korisnik knjige slučajeva može ponovno analizirati, protokole analize specifične za panel ClearLLab 10C namijenjene za korištenje s listmode podacima i izvješće o analizi provedenoj s pomoću navedenih protokola. Svako izvješće sadrži napomene o analizi kojima se ističu imunofenotipski nalazi i mogući problemi. NAPOMENA: Primjeri u knjizi slučajeva služe isključivo u ilustrativne svrhe i ne predstavljaju nužno sve kategorije hematolimfoidnih novotvorina niti opisuju odnosno demonstriraju sve moguće imunofenotipske varijante. POZADINA Imunofenotipizacija protočnom citometrijom analizira prisutnost i odsustvo specifičnih antigena za svaku pojedinačnu stanicu u uzorku. Kada se skupno promatraju, ti rezultati daju imunofenotipski profil za svaku stanicu koji je ili dosljedan s očekivanom populacijom (tj. normalan) ili nije dosljedan s očekivanom populacijom (tj. abnormalan) u toj vrsti uzorka. Pri analizi uzoraka pacijenata za koje se sumnja da imaju hematolimfoidne maligne bolesti, provodi se nekoliko koraka 1 :

• Procjena svih populacija stanica u uzorku.

• Označavanje svake populacije stanica kao „normalne” ili „abnormalne”.

• Detaljna karakterizacija abnormalne populacije prema prisutnosti ili odsustvu antigena, kao i povećan ili smanjen intenzitet bojenja antitijelima označenima fluorokromom. • Tumačenje abnormalnog imunofenotipa, priključivanje dodatnih informacija, ako je to moguće, koje mogu uključivati kliničku povijest, histologiju, citologiju, imunohistokemiju i studije genotipizacije kao što su hibridizacija na lokaciji, kariotipizacija i molekularna dijagnostika.

Svaka je stanica važna

3

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

OPĆE PREPORUKE ZA IMUNOFENOTIPIZACIJU Opće preporuke za imunofenotipizaciju uzoraka protočnom citometrijom pacijenata s poznatom ili mogućom hematolimfoidnommalignom bolesti javile su se tijekom posljednja dva desetljeća te je objavljeno nekoliko smjernica u znanstvenoj literaturi. Imunofenotipizacija protočnom citometrijom uključena je u Klasifikaciju WHO-a za tumore hematopoetskih i limfoidnih tkiva od 2008 2 . Medicinski pokazatelji i provjera testa protočnom citometrijom koja obuhvaća predanalitičke, analitičke i postanalitičke pojedinosti ispitivanja raspravljeni su preporukama 3,4,5 konferencije 2006 Bethesda International Consensus Conference i smjernicama za praksu ICSH-a/ICCS-a za testove fluorescencije na temelju stanica 6,7,8 . NAMJENA PANELA ClearLLab 10C Paneli ClearLLab 10C namijenjeni su za korištenje u dijagnostici „In Vitro” za kvalitativnu identifikaciju populacija stanica pomoću višeparametarske imunofenotipizacije na protočnim citometrima Navios i Navios EX. Reagensi se koriste kao pomagalo u diferencijalnoj dijagnozi pacijenata s hematološkim abnormalnostima u kojih postoje sljedeće hematopoetske novotvorine ili se sumnja na njih: kronična leukemija, akutna leukemija, ne-Hodgkinov limfom, mijelom, mijelodisplastični sidrom (MDS) i/ili mijeloproliferativne novotvorine (MPN). Reagensi se mogu koristiti s uzorcima periferne pune krvi (prikupljenima uz korištenje antikoagulansa K 2 EDTA, otopine kiseline, citrata i dekstroze (ACD-a) ili heparina), koštane srži (prikupljene uz korištenje antikoagulansa K 2 EDTA, ACD-a ili heparina) i limfnih čvorova. Tumačenje rezultata mora potvrditi patolog ili sličan stručnjak i pritom u obzir mora uzeti ostale kliničke i laboratorijske nalaze.

Reagensi daju višeparametarske kvalitativne rezultate za sljedeće površinske antigene:

Paneli ClearLLab 10C

Plavi laser

Crveni laser

Ljubičasti laser

Broj dijela

APC- A750 PB KRO

Epruveta

FITC PE ECD PC5.5 PC7 APC APC- A700

B96805 Epruveta za B-stanice

Kapa Lambda CD10 CD5 CD200 CD34 CD38 CD20 CD19 CD45

B96806 Epruveta za T-stanice

CD4

CD2 CD56 CD5 CD34 CD7

CD8

CD3 CD45

TCR γδ

B96807 Epruveta za M1-stanice

CD16

CD7

CD10 CD13 CD64 CD34 CD14 HLA-DR CD11b CD45

B96808 Epruveta za M2-stanice

CD15

CD123 CD117 CD13 CD33 CD34 CD38 HLA-DR CD19 CD45

Svaka je stanica važna

4

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

KOMPLET ZA KOMPENZACIJU ClearLLab

Plavi laser

Crveni laser

Ljubičasti laser

Broj dijela

APC- A750 PB KRO

FITC

PE

ECD PC5.5

PC7

APC APC- A700

B74074

CD4

CD4

CD3

CD4

CD4

CD4

CD4

CD4

CD4

CD8

Prethodno navedeni reagens nudi se u standardiziranom formatu koji se koristi s reagensima za pripremu uzoraka i podešavanje citometra, skupa sa softverom za prikupljanje i analizu podataka. Paneli ClearLLab 10C pridržavaju se preporuka za standardizaciju prema navedenom u smjernicama konferencije Bethesda 2 . Dodatne informacije o panelima ClearLLab 10C dostupne su na stranici beckman.com/ClearLLab . ODABIR SLUČAJA I INTERPRETACIJA Podaci predstavljeni u ovoj knjizi slučajeva proizvedeni su prema postupku navedenom u Uputama za uporabu panela ClearLLab 10C dostupnima na stranici beckman.com . Reprezentativni slučajevi odabrani su na temelju podataka iz kliničkih ispitivanja te su ih pregledali, komentirali i protumačili:

dr. med. Brent Wood, PhD Profesor, laboratorijska medicina i patologija Voditelj odjela, Hematopatologija Direktor, Laboratorij za hematopatologiju i patologiju SCCA-a Medicinski direktor, SCCA Laboratoriji Sveučilište u Washingtonu, Seattle, WA, SAD

dr. med. Xueyan Chen, PhD Asistent profesora, Laboratorijska medicina Pomoćni direktor, Laboratorij za hematopatologiju Sveučilište u Washingtonu, Seattle, WA

dr. med. Yi Zhou, PhD Asistent profesora Zavod za laboratorijsku medicinu Sveučilište u Washingtonu, Seattle, WA

Protokoli za analizu: Preuzmite protokol za analizu za ClearLLab 10C. Analiza: Preuzmite datoteke za analizu Kaluza C prema specifičnom slučaju.

Svaka je stanica važna

5

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

POVEZANI DOKUMENTI

REFERENCE 1. Flow Cytometric Immunophenotyping for Hematologic Neoplasms. F.E. Craig, K.A. Foon. Blood. 2008.; 111; 3941-3967. 2. Swerdlow SH, Campo E, Harris NL, Jaffe EA, Pileri SA, Stain H, Thiele J, & Vardiman JW (eds) (2008) WHO Classification of Tumors of Haematopoietic and Lymphoid Tissues. IARC Press: Lyon 3. The 2016 revision of the World Health Organization classification of lymphoid neoplasms. Swerdlow SH, et al. Blood. 2016.;127:2375-90. 4. The 2016 revision of the World Health Organization classification of myeloid neoplasms and acute leukemia. Arber DA, et al. Blood 2016. 127:2391-2405. 5. 2006 Bethesda International Consensus recommendations on the immunophenotypic analysis of hematolymphoid neoplasia by flow cytometry: optimal reagents and reporting for the flow cytometric diagnosis of hematopoietic neoplasia. Wood BL, Arroz M, Barnett D, DiGiuseppe J, Greig B, Kussick SJ, Oldaker T, Shenkin M, Stone E, Wallace P. Cytometry B Clin Cytom. 2007.;72 dodat. 1:S14-22 6. 2006 Bethesda International Consensus recommendations on the flow cytometric immunophenotypic analysis of hematolymphoid neoplasia: medical indications. Davis BH, Holden JT, Bene MC, Borowitz MJ, Braylan RC, Cornfield D, Gorczyca W, Lee R, Maiese R, Orfao A, Wells D, Wood BL, Stetler-Stevenson M. Cytometry B Clin Cytom. 2007.;72 dodat. 1:S5-13 7. 2006 Bethesda International Consensus Conference on Flow Cytometric Immunophenotyping of Hematolymphoid Neoplasia. Stetler-Stevenson M, Davis B, Wood B, Braylan R. Cytometry B Clin Cytom. 2007.;72 dodat. 1:S3 8. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part III - analytical issues. Tanqri S, Vall H, Kaplan D, Hoffman B, Purvis N, Porwit A, Hunsberger B, Shankey TV; radna skupina ICSH/ICCS. Cytometry B Clin Cytom. 2013. ruj. - lis.;84(5):291-308. DOI: 10.1002/cyto.b.21106 9. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part IV - postanalytic considerations. Barnett D, Louzao R, Gambell P, De J, Oldaker T, Hanson CA; radna skupina ICSH/ICCS. Cytometry B Clin Cytom. 2013. ruj. - lis.;84(5):309-14. DOI: 10.1002/cyto.b.21107 10. Validation of cell-based fluorescence assays: practice guidelines from the ICSH and ICCS - part V - assay performance criteria. Wood B, Jevremovic D, Béné MC, Yan M, Jacobs P, Litwin V; radna skupina ICSH/ICCS. Cytometry B Clin Cytom. 2013. ruj. - lis.;84(5):315-23. DOI: 10.1002/cyto.b.2110 • ClearLLab 10C Application System Guide (Priručnik za sustav aplikacije ClearLLab 10C), PN C28531AA • Kaluza C Flow Cytometry Software Instructions For Use (Upute za uporabu sustava za protočnu citometriju Kaluza C), PN C25279 • Navios Flow Cytometer Instructions For Use (Upute za uporabu protočnog citometra Navios), PN C28481AA • Navios EX Flow Cytometer Instructions For Use (Upute za uporabu protočnog citometra Navios EX), PN B91281AB • ClearLLab 10C Panels Instructions For Use (Upute za uporabu panela ClearLLab 10C), PN C00197 • ClearLLab Compensation Beads Instructions For Use (Upute za uporabu proizvoda ClearLLab Compensation Beads), PN C00201 • ClearLLab Compensation Kit Instructions For Use (Upute za uporabu kompleta za kompenzaciju ClearLLab), PN B74074 • ClearLLab Control Cells Instructions For use (Upute za uporabu proizvoda ClearLLab Control Cells ), PN B99884 • ClearLLab Control Cells QC Analysis Protocols Download Addendum (Dodatak za preuzimanje protokola za analizu ClearLLab Control Cells QC), PN C33273AA

Svaka je stanica važna

6

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

SLUČAJEVI Sljedeće ograđivanje prema prednosti boja primjenjuje se na sljedeće slučajeve:

Limfociti (ograda Ly)/NK-stanice: crvena B-stanice pozitivne na CD19: narančasta T-stanice pozitivne na CD3: svjetloplava

Monociti (ograda Mo): zelena Granulociti (ograda Gr): plava

CD45dim: ljubičasta Dodatne abnormalne populacije: zelenoplava populacija negativna na CD45: siva

NEMA IMUNOFENOTIPSKE ABNORMALNOSTI Protočna citometrija predstavlja način za karakterizaciju populacija leukocita. Ona može biti od pomoći u diferencijalnoj dijagnozi bolesnika s hematološkim abnormalnostima koji imaju hematopoetsku neoplaziju ili se u nju sumnja, uključujući kroničnu leukemiju, akutnu leukemiju, ne-Hodgkinov limfom, mijelom, mijelodisplastični sindrom (MDS) i/ili mijeloproliferativne novotvorine (MPN). Ključno je za identifikaciju abnormalnih populacija u tim kliničkim situacijama poznavanje populacija normalnih stanica koje se nalaze u uzorcima pune krvi, koštane srži tkiva koštane srži. U nastavku su primjeri normalnih uzoraka obojanih panelima ClearLLab 10C.

PERIFERNA PUNA KRV Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Klinička vinjeta Ovaj 65-godišnji muškarac ima simptome trombocitopenije. Uzorak periferne pune krvi predaje se na imunofenotipizaciju protočnom citometrijom uz uporabu panela ClearLLab 10C. Imunofenotipizacija protočnom citometrijom

Epruveta za B-stanice

Slika 1: Ovaj točkasti dijagram koji prikazuje odnos ograde Time (Vrijeme) i CD45 je neograđen te sekvencijalno pokazuje sve prikupljene stanice. Ovaj je dijagram namijenjen za procjenu fluidne perturbacije tijekom prikupljanja uzoraka. Stabilno prikupljanje prikazano je ujednačenim uzorkom stanica tijekom vremena. Stanice koje odstupaju od stabilnog uzorka mogu biti isključene u ogradi Time (Vrijeme).

Slika 2: Ovaj točkasti dijagram s odnosom FS INT (Integralna vrijednost prednjeg raspršenja) i FS PEAK (Vršna vrijednost prednjeg raspršenja) prikazuje stanice u ogradi Time (Vrijeme). Ovim se dijagramom isključuju parovi stanica ili agregate. Pojedinačne vrijednosti stanica prikazuju linearan odnos za odnos INT (Integralna vrijednost) i PEAK (Vršna vrijednost) te su uključene u ogradu Singlets (Pojedinačne vrijednosti), dok su parovi stanica izvan linearnog odnosa.

Sadržaj > Nema imunofenotipske abnormalnosti > Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Svaka je stanica važna

7

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

Epruveta za B-stanice

Slika3:Ovajtočkastidijagramodnosabočnograspršenja iprednjegraspršenjaprikazuje stanice u ogradi Singlets (Pojedinačne vrijednosti). Ovim se dijagramom isključuju ostaci stanica, koji obično imaju smanjeno prednje raspršenje. Rane apoptotične stanice također imaju blago povećano bočno raspršenje, dok kasne apoptotične i nekrotične stanice imaju varijabilno umanjeno bočno raspršenje. Održive stanice uključene su u ogradu Cells (Stanice).

Slika 4: Ovaj točkasti dijagram odnosa CD45 i bočnog raspršenja prikazuje stanice u ogradi Cells (Stanice). Ovimse dijagramomoznačuju različiti podskupovi bijelih krvnih stanica, koji su ograđeni kao stanice pozitivne na CD45. Populacija stanica negativnih na CD45 obično uključuje crvene krvne stanice, agregate trombocita, ostatke tkiva ili nehematopoetske stanice.

Slika 6: Ovaj točkasti dijagram odnosa CD19 i bočnog raspršenja prikazuje stanice u ogradi Cells (Stanice). U ogradi CD19+ identificirane su stanice pozitivne na CD19. CD19 se izražava na zrelim i nezrelim B-stanicama, kao i na većini stanica plazme. Te stanice obično imaju nisko do umjereno bočno raspršenje.

Slika 5: Ovaj točkasti dijagram odnosa CD45 i bočnog raspršenja prikazuje stanice u ogradi CD45+. Uovomse točkastomdijagramu razlikuju nekoliko populacija leukocita koji se obično nalaze u uzorcima periferne krvi, koštane srži i limfnih čvorova, uključujući limfocite (ograda Ly, crvena/narančasta), monocite (ograda Mo, zelena) i granulocite (ograda Gr, plava). Ograda CD45dim (blage ekspresije) (ljubičasta) pokriva područje koje obično zauzimaju rani progenitori kao što su mijeloblasti i nezrele B-stanice. U ovom se područjumogu izraziti i bazofili, plazmacitoidne dendritične stanice, stanice plazme i NK-stanice. Primjenom različitih boja na stanice u svakoj ogradi mogu se identificirati različite populacije stanica tijekom analize.

Sadržaj > Nema imunofenotipske abnormalnosti > Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Svaka je stanica važna

8

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

Epruveta za B-stanice

Slika 7: Ovaj točkasti dijagramkapa i bočnog raspršenja prikazuje sve održive stanice. Površinski lagani kapa lanac izražava se na zrelim B-stanicama (narančasta) te na nezrelimB-stanicama posljednjeg stadija. Udio kapa pozitivnihB-stanica obično je veći od udjela kapa negativnih (lambda pozitivnih) B-stanica. Jasna kapa pozitivnost vidi se na monocitima (zelena) zbog vezivanja imunoglobulina s pomoću Fc receptora. Pozitivne stanice kapa laganog lanca prikazane su na desnoj strani dijagrama.

Slika 8: Ovaj točkasti dijagram odnosa lambda i bočnog raspršenja prikazuje sve održive stanice. Površinski lambda lagani lanac izražava se na zrelim B-stanicama (narančasta) te na nezrelim B-stanicama posljednjeg stadija. Udio lambda pozitivnih B-stanica obično je manji od udjela lambda negativnih (kapa pozitivnih) B-stanica. Jasna lambdapozitivnostvidisenamonocitima(zelena)zbogvezivanja imunoglobulina s pomoću Fc receptora. Pozitivne stanice lambda laganog lanca prikazane su na desnoj strani dijagrama.

Slika 9: Ovaj točkasti dijagramodnosa CD10 i bočnog raspršenja prikazuje sve održive stanice. CD10 se izražava na nezrelimB-stanicama, zrelimB-stanicama germinativnog centra te zrelimgranulocitima (plava). Granulociti imaju visoko bočno raspršenje, dok limfoidne stanice imaju nisko bočno raspršenje.

Slika 10: Ovaj točkasti dijagramodnosa CD5 i bočnog raspršenja prikazuje sve održive stanice. CD5 izražava se na nezrelim i zrelim T-stanicama (crvena, dolje desno), kao i blago na podskupu zrelih B-stanica (narančasta). Te limfoidne stanice obično imaju nisko bočno raspršenje.

Sadržaj > Nema imunofenotipske abnormalnosti > Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Svaka je stanica važna

9

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

Epruveta za B-stanice

Slika 11: Ovaj točkasti dijagram odnosa CD200 i bočnog raspršenja prikazuje sve održive stanice. CD200 se obično izražava na B-stanicama, no negativan je na nekim neoplastičnim B-stanicama. Osobito je koristan u razlikovanju limfoma plaštenih stanica (obično CD200 negativnog) od kronične limfocitne leukemije / limfomamalih limfocita (obično CD200 pozitivnih).

Slika 12: Ovaj točkasti dijagramodnosa CD34 i bočnog raspršenja prikazuje sve održive stanice.CD34biljeg jeranihhematopoetskihprogenitora.Izražavasenahematopoetskim matičnim stanicama, ranim mijeloidnim progenitorima (mijeloblastima) te nezrelim B i T-stanicama (limfoblastima). Zreli granulociti, monociti i limfociti negativni su na CD34. Progenitori pozitivni na CD34 obično predstavljaju manje od 0,01 % leukocita u perifernoj krvi.

Slika 14: Ovaj točkasti dijagramodnosa CD20 i bočnog raspršenja prikazuje sve održive stanice. CD20 izražava se na zrelim B-stanicama (narančasta) te u varijabilno niskoj mjeri na podskupu zrelih T-stanica. Varijabilno se izražava na nezrelim B-stanicama kasnijeg stadija. Stanice pozitivne na CD20 obično se nalaze u ogradi limfocita s niskim bočnim raspršenjem.

Slika 13: Ovaj točkasti dijagram odnosa CD38 i bočnog raspršenja prikazuje sve održive stanice. CD38 je aktivacijski biljeg. Izražava se u najvišoj mjeri na stanicama plazme, u srednjoj mjeri na nezrelimmijeloidnim i limfoidnim progenitorima, u niskoj mjeri na monocitima (zelena) te u varijabilnoj mjeri na aktiviranim zrelim limfocitima.

Sadržaj > Nema imunofenotipske abnormalnosti > Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Svaka je stanica važna

10

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

Epruveta za B-stanice

Slika 15. Ovaj točkasti dijagramodnosa lambda i kapa prikazuje sve CD19+ stanice. Na ranimnezrelimB-stanicama (ljubičasta) ne izražavaju se površinski imunoglobulinski lagani lanci, tj. negativne su na kapa i lambda lagane lance. Zrele B-stanice poliklonske su te se na njima izražava ili kapa ili lambda lagani lanac. Uobičajeni omjer kape i lambde je 1,4 s rasponom između 1 i 2. Uobičajena je povećana pozadina zbog prianjajućeg plazma imunoglobulina.

Slika 16. Ovaj točkasti dijagram odnosa CD19 i CD20 pokazuje sve stanice u ogradi limfocita (Ly). Na zrelim B-stanicama izražavaju se i CD19 i CD20 (narančasta). Na nekim se neoplastičnim B-stanicama može izraziti CD19 ili CD20 u umanjenoj mjeri.

Slika 18. Ovaj točkasti dijagram odnosa CD38 i CD10 pokazuje sve stanice u ogradi limfocita (Ly). CD38 izražava se u najvišoj mjeri na stanicama plazme, u srednjoj mjeri na nezrelim B-stanicama te u niskoj mjeri na B-stanicama germinativnog centra. Većina zrelih B-stanica (narančasta) pokazuje nisku do neprisutnu ekspresiju CD38. T-stanice (crvena) pokazuju varijabilnu ekspresiju CD38 koja ovisi o stanju aktivacije.

Slika 17. Ovaj točkasti dijagram odnosa CD19 i CD10 pokazuje sve stanice u ogradi limfocita (Ly). B-stanice pozitivne su na CD19 (narančasta). Zrele B-stanice pozitivne naCD10distribuiraju se u germinativnimcentrima u limfnimčvorovima, amali podskup nezrelihB-stanicaposljednjegstadijaprisutan jeuperifernojkrvi iaspiratimakoštanesrži.

Sadržaj > Nema imunofenotipske abnormalnosti > Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Svaka je stanica važna

11

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

Epruveta za B-stanice

Slika 19. Ovaj točkasti dijagram odnosa CD20 i CD10 pokazuje sve stanice u ogradi limfocita (Ly). Na većini zrelih B-stanica ravnomjerno se izražava CD20 u visokoj mjeri bez CD10.

Slika 20. Ovaj točkasti dijagram odnosa CD19 i CD5 pokazuje sve stanice u ogradi limfocita (Ly). CD5 se izražava na T-stanicama (crvena, gore lijevo), varijabilno se izražava u niskoj mjeri na podskupu normalnih zrelih B-stanica (narančasta), te na nekim podtipovima neoplastičnih B-stanica.

Slika 22. Ovaj točkasti dijagram odnosa CD5 i CD200 pokazuje sve stanice u ogradi limfocita (Ly). Na većini zrelihB-stanica obično se izražavaCD200, dok seCD5 izražava varijabilno na podskupu zrelih B-stanica. Na neoplastičnim B-stanicama u kroničnoj limfocitnoj leukemiji / limfomumalih limfocita obično se izražavaju CD5 i CD200, dok se u limfomu plaštenih stanica obično izražava CD5, ali ne CD200.

Slika 21. Ovaj točkasti dijagram odnosa CD20 i CD200 pokazuje sve stanice u ogradi limfocita (Ly). Na većini zrelih B-stanica (narančasta) izražava se CD200 u niskoj do umjerenoj mjeri.

Sadržaj > Nema imunofenotipske abnormalnosti > Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Svaka je stanica važna

12

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

Epruveta za T-stanice

Slika 1: Ovaj točkasti dijagram koji prikazuje odnos ograde Time (Vrijeme) i CD45 je neograđen te sekvencijalno pokazuje sve prikupljene stanice. Ovaj je dijagram namijenjen za procjenu fluidne perturbacije tijekom prikupljanja uzoraka. Stabilno prikupljanje prikazano je ujednačenim uzorkom stanica tijekom vremena. Stanice koje odstupaju od stabilnog uzorka mogu biti isključene u ogradi Time (Vrijeme).

Slika 2: Ovaj točkasti dijagram s odnosom FS INT (Integralna vrijednost prednjeg raspršenja) i FS PEAK (Vršna vrijednost prednjeg raspršenja) prikazuje stanice u ogradi Time (Vrijeme). Ovim se dijagramom isključuju parovi stanica ili agregate. Pojedinačne vrijednosti stanica prikazuju linearan odnos za odnos INT (Integralna vrijednost) i PEAK (Vršna vrijednost) te su uključene u ogradu Singlets (Pojedinačne vrijednosti), dok su parovi stanica izvan linearnog odnosa.

Slika 3: Ovaj točkasti dijagram odnosa bočnog raspršenja i prednjeg raspršenja prikazuje stanice u ogradi Singlets (Pojedinačne vrijednosti). Ovim se dijagramom isključuju ostaci stanica koji obično imaju smanjeno prednje raspršenje uz povećano bočno raspršenje. Rane apoptotične stanice također imaju blago povećano bočno raspršenje, dok kasne apoptotične i nekrotične stanice imaju varijabilno smanjeno bočno raspršenje. Održive stanice uključene su u ogradu Cells (Stanice).

Slika 4: Ovaj točkasti dijagram odnosa CD45 i bočnog raspršenja prikazuje stanice u ogradi Cells (Stanice). Ovim se dijagramom označavaju različiti tipovi bijelih krvnih stanica koji su pozitivni na CD45. Populacija stanica negativnih na CD45 obično uključuje crvene krvne stanice, agregate trombocita ili nehematopoetske stanice.

Sadržaj > Nema imunofenotipske abnormalnosti > Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Svaka je stanica važna

13

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

Epruveta za T-stanice

Slika 5: Ovaj točkasti dijagram odnosa CD45 i bočnog raspršenja prikazuje stanice u ogradi CD45+. Uovomse točkastomdijagramu razlikuje nekoliko populacija leukocita koji se obično nalaze u uzorcima periferne krvi, koštane srži i limfnih čvorova, uključujući limfocite (ograda Ly, crvena/svjetloplava), monocite (ogradaMo, zelena) i granulocite (ograda Gr, plava). Ograda CD45dim (blage ekspresije) (ljubičasta) pokriva područje koje obično zauzimaju mijeloblasti i nezrele B-stanice. U ovo područje mogu spadati i bazofili, plazmacitoidne dendritične stanice, stanice plazme i NK-stanice. Primjenom različitih boja na stanice u svakoj ogradi mogu se pratiti različite populacije stanica tijekom analize.

Slika 6: Ovaj točkasti dijagramodnosa CD3 i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. Ograda CD3+ identificira stanice na kojima se izražava površinski CD3 (svjetloplava). CD3 je vrlo specifičan za T-stanice jer se izražava samo na površini zrelih T-stanica te nezrelih T-stanica kasnijih stadija. Te stanice obično imaju nisko do umjereno bočno raspršenje.

Slika 8: Ovaj točkasti dijagramodnosa CD4 i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. CD4 se izražava na podskupu nezrelih i zrelih T-stanica u visokoj mjeri (svjetloplava). CD4 se izražava i na monocitnim stanicama (zelena) u manjoj mjeri nego kod T-stanica pozitivnih na CD4.

Slika 7: Ovaj točkasti dijagramodnosa TCR γδ i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. TCR γδ je podjedinica receptora T-stanica i izražava se na malom podskupu citotoksičnih T-stanica. Te stanice obično imaju nisko bočno raspršenje (svjetloplava).

Sadržaj > Nema imunofenotipske abnormalnosti > Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Svaka je stanica važna

14

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

Epruveta za T-stanice

Slika 9: Ovaj točkasti dijagramodnosa CD2 i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. CD2 je antigen koji se izražava na gotovo svim nezrelim i zrelim T-stanicama (svjetloplava). CD2 se također izražava na NK-stanicama (crvena, dolje desno) i u niskoj mjeri na monocitima (zelena).

Slika 10: Ovaj točkasti dijagram odnosa CD56 i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. CD56 se obično izražava na velikompodskupu NK-stanica (crvena), T-stanicama s aktivnošću prirodnih stanica ubojica (NK/T-stanicama) i mnogimgama/ delta T-stanicama (svjetloplava). CD56 se također djelomično izražava namonocitnim stanicama (zelena) u reaktivnim i neoplastičnim uvjetima.

Slika 11: Ovaj točkasti dijagramodnosa CD5 i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. CD5 izražava se na većini nezrelih i zrelih T-stanica (svjetloplava) te u niskoj mjeri na podskupu zrelih B-stanica. Na vrlo ranim nezrelimT-stanicama i gama/delta T-stanicama obično se izražava CD5 u niskoj mjeri ili se uopće ne izražava. CD5 se izražava na malom podskupu NK-stanica.

Slika 12: Ovaj točkasti dijagramodnosa CD34 i bočnog raspršenja prikazuje sve održive stanice.CD34biljeg jeranihhematopoetskihprogenitora.Izražavasenahematopoetskim matičnim stanicama, ranim mijeloidnim progenitorima (mijeloblastima) te nezrelim B i T-stanicama (limfoblastima). Zreli granulociti, monociti i limfociti negativni su na CD34. Progenitori pozitivni na CD34 obično predstavljaju manje od 0,01 % leukocita u perifernoj krvi.

Sadržaj > Nema imunofenotipske abnormalnosti > Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Svaka je stanica važna

15

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

Epruveta za T-stanice

Slika 13: Ovaj točkasti dijagramodnosa CD7 i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. CD7 se izražava na nezrelim T-stanicama tijekom najranijeg stadija razvoja T-stanica, prisutan je tijekomdozrijevanja T-stanica te se varijabilno izražava na zrelim T-stanicama (svjetloplava). Također se ravnomjerno izražava naNK-stanicama (crvena, dolje desno) te se blago izražava na podskupu plazmacitoidnih dendritičnih stanica i podskupu pripadnih lozi progenitora pozitivnih na CD34.

Slika 14: Ovaj točkasti dijagramodnosa CD8 i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. CD8 se izražava na podskupu nezrelih i zrelih T-stanica (svjetloplava) te definira populaciju citotoksičnih zrelih T-stanica. Varijabilno se izražava u niskoj mjeri na NK-stanicama i gama-delta T-stanicama.

Slika 15. Ovaj točkasti dijagram odnosa CD3 i CD56 pokazuje sve stanice u prolazu limfocita (Ly). T-stanice definirane su ekspresijom CD3, s obzirom da je prisutan na svim zrelim T-stanicama te se ne izražava na stanicama drugih loza. Po definiciji na NK-stanicama ne izražava se površinski CD3, no izražava se CD56 na velikom podskupu (crvena, gore lijevo). CD56 se izražava također na malim podskupovima zrelih T-stanica, pogotovo T-stanica s aktivnošću prirodnih stanica ubojica (NK/T- stanice) i gama-delta T-stanica.

Slika 16. Ovaj točkasti dijagram odnosa CD5 i CD3 pokazuje sve stanice u prolazu limfocita (Ly). CD3 i CD5 se zajedno izražavaju na većini zrelih T-stanica (svjetloplava), iako mali podskup citotoksičnih T-stanica koje imaju morfologiju velikih zrnastih limfocita često pokazuje smanjenu do neprisutnu ekspresiju CD5. CD5 ne izražava se na većini NK-stanica.

Sadržaj > Nema imunofenotipske abnormalnosti > Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Svaka je stanica važna

16

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

Epruveta za T-stanice

Slika 18. Ovaj točkasti dijagram odnosa CD8 i CD4 pokazuje sve stanice u prolazu limfocita (Ly). T-stanice pozitivne na CD3 (svjetloplava) sadržavaju podskupove pozitivne na CD4 (pomoćne) i podskupove pozitivne na CD8 (citotoksične). T-stanice pozitivne na CD4 obično brojno nadmašuju T-stanice pozitivne na CD8 s omjerom CD4:CD8 od 1:1 do 4:1 u perifernoj krvi. Prisutne su i povremene T-stanice dvostruko negativne ili dvostruko pozitivne na CD4 i CD8. Dvostruko negativne T-stanice obično se uglavnom sastoje od gama/delta T-stanica. Napomena: stanice pozitivne na CD4, no negativne na CD3 (crvena, sredina lijevo) sumonociti uključeni u ogradu limfocita. Time se pokazuje da samo ograđivanje odnosa CD45 i bočnog raspršenja ne dopušta čistu identifikaciju limfocita.

Slika 17. Ovaj točkasti dijagram odnosa CD7 i CD2 pokazuje sve stanice u prolazu limfocita (Ly). CD2 i CD7 izražavaju se zajedno na velikoj većini zrelih T-stanica (svjetloplava) i NK-stanica (crvena, gore desno).

Slika 19. Ovaj točkasti dijagram odnosa CD3 i CD4 pokazuje sve stanice u prolazu limfocita (Ly). Na svimstanicama pozitivnima na CD4 izražava se CD3. Namonocitima i plazmacitoidnim dendritičnim stanicama izražava se CD4 u manjoj mjeri nego na T-stanicama pozitivnima na CD4, te se na tim stanicama ne izražava CD3. Na NK- stanicama ne izražavaju se niti CD3 niti CD4.

Slika 20. Ovaj točkasti dijagram odnosa CD3 i CD8 pokazuje sve stanice u prolazu limfocita (Ly). Na svimT-stanicama pozitivnima na CD8 izražava se CD3 (svjetloplava). Na malom podskupu NK-stanica također se izražava CD8 (crvena, gore lijevo), no ne i CD3.

Sadržaj > Nema imunofenotipske abnormalnosti > Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Svaka je stanica važna

17

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

Epruveta za T-stanice

Slika 21. Ovaj točkasti dijagram odnosa CD3 i TCR γδ pokazuje sve stanice u prolazu limfocita (Ly). TCR gama/delta izražava se na malom podskupu T-stanica, uz CD3. Visoko linearni odnos između CD3 i TCR nastaje zbog njihove prisutnosti kao heterodimeričnog kompleksa s fiksnim omjerom 1:1, tako da povećana ekspresija jednog pokazuje povećanu ekspresiju drugog.

Sadržaj > Nema imunofenotipske abnormalnosti > Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Svaka je stanica važna

18

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

Epruveta za M1-stanice

Slika 1: Ovaj točkasti dijagram koji prikazuje odnos ograde Time (Vrijeme) i CD45 je neograđen te sekvencijalno pokazuje sve prikupljene stanice. Ovaj je dijagram namijenjen za procjenu fluidne perturbacije tijekom prikupljanja uzoraka. Stabilno prikupljanje prikazano je ujednačenim uzorkom stanica tijekom vremena. Stanice koje odstupaju od stabilnog uzorka mogu biti isključene u ogradi Time (Vrijeme).

Slika 2: Ovaj točkasti dijagram s odnosom FS INT (Integralna vrijednost prednjeg raspršenja) i FS PEAK (Vršna vrijednost prednjeg raspršenja) prikazuje stanice u ogradi Time (Vrijeme). Ovim se dijagramom isključuju parovi stanica ili agregate. Pojedinačne vrijednosti stanica prikazuju linearan odnos za odnos INT (Integralna vrijednost) i PEAK (Vršna vrijednost) te su uključene u ogradu Singlets (Pojedinačne vrijednosti), dok su parovi stanica izvan linearnog odnosa.

Slika 4: Ovaj točkasti dijagram odnosa CD45 i bočnog raspršenja prikazuje stanice u ogradi Cells (Stanice). Ovimse dijagramomoznačuju različiti podskupovi bijelih krvnih stanica, koji su ograđeni kao stanice pozitivne na CD45. Populacija stanica negativnih na CD45 obično uključuje crvene krvne stanice, agregate trombocita, ostatke tkiva ili nehematopoetske stanice.

Slika 3: Ovaj točkasti dijagram odnosa bočnog raspršenja i prednjeg raspršenja prikazuje stanice u ogradi Singlets (Pojedinačne vrijednosti). Ovim se dijagramom isključuju ostaci stanica koji obično imaju smanjeno prednje raspršenje uz povećano bočno raspršenje. Rane apoptotične stanice također imaju blago povećano bočno raspršenje, dok kasne apoptotične i nekrotične stanice imaju varijabilno smanjeno bočno raspršenje. Održive stanice uključene su u ogradu Cells (Stanice).

Sadržaj > Nema imunofenotipske abnormalnosti > Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Svaka je stanica važna

19

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

Epruveta za M1-stanice

Slika 5: Ovaj točkasti dijagram odnosa CD45 i bočnog raspršenja prikazuje stanice u ogradi CD45+. U ovom se točkastom dijagramu razlikuje nekoliko populacija leukocita koji se obično nalaze u uzorcima periferne krvi, koštane srži i limfnih čvorova, uključujući limfocite (ograda Ly, crvena), monocite (ograda Mo, zelena) i granulocite (ograda Gr, plava). Ograda CD45dim (blage ekspresije) (ljubičasta) pokriva područje koje obično zauzimaju mijeloblasti i nezrele B-stanice. U ovo područje mogu spadati i bazofili, plazmacitoidne dendritične stanice, stanice plazme i NK-stanice. Primjenom različitih boja na stanice u svakoj ogradi mogu se pratiti različite populacije stanica tijekom analize.

Slika 6: Ovaj točkasti dijagramodnosa CD16 i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. CD16 izražava se u najvišoj mjeri na zrelim granulocitima (plava). CD16 (crvena, dolje desno) izražava se na većini NK-stanica, kao i na podskupu aktiviranih monocita (zelena).

Slika 8: Ovaj točkasti dijagramodnosa CD10 i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. CD10 se izražava na nezrelimB-stanicama, zrelimB-stanicama germinativnog centra te zrelimgranulocitima (plava). Granulociti imaju visoko bočno raspršenje, dok limfoidne stanice imaju nisko bočno raspršenje.

Slika 7: Ovaj točkasti dijagramodnosa CD7 i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. CD7 izražava se na nezrelim T-stanicama tijekom najranijeg stadija razvoja T-stanica, prisutan je tijekom sazrijevanja T-stanica te se varijabilno izražava na zrelim T-stanicama (crvena, dolje desno). Također se izražava na NK-stanicama te se blago izražava na podskupu plazmacitoidnih dendritičnih stanica i podskupu pripadnih loza progenitora.

Sadržaj > Nema imunofenotipske abnormalnosti > Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Svaka je stanica važna

20

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

Epruveta za M1-stanice

Slika 9: Ovaj točkasti dijagramodnosa CD13 i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. CD13 izražava se na sazrijevajućimgranulocitima (plava), zrelimmonocitima (zelena) i mijeloidnim progenitorima (ljubičasta).

Slika 10: Ovaj točkasti dijagramodnosaCD64 i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. CD64 izražava se u najvišoj mjeri na zrelim monocitima (zelena). CD64 ne izražava se jasno na neaktivnim zrelim granulocitima (plava), no njegova ekspresija postaje jasnija s aktivacijomgranulocita. CD64 ne izražava se na limfocitima (crvena) ili većini progenitora pozitivnih na CD34. Aktivirani zreli monociti izražavaju CD64 u nižoj mjeri i imaju manje bočno raspršenje.

Slika 12: Ovaj točkasti dijagramodnosa CD14 i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. CD14 izražava se u visokoj mjeri na zrelim monocitima (zeleno) te u niskoj mjeri na zrelimgranulocitima (plava). Aktivirani zreli monociti izražavaju CD14 u nižoj mjeri i imaju manje bočno raspršenje.

Slika 11: Ovaj točkasti dijagram odnosa CD34 i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. CD34 biljeg je ranih hematopoetskih progenitora. Izražava se na hematopoetskimmatičnimstanicama,ranimmijeloidnimprogenitorima(mijeloblastima) te nezrelim B i T-stanicama (limfoblastima). Zreli granulociti, monociti i limfociti negativni su na CD34. Progenitori pozitivni na CD34 obično predstavljaju manje od 0,01 % leukocita u perifernoj krvi.

Sadržaj > Nema imunofenotipske abnormalnosti > Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Svaka je stanica važna

21

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

Epruveta za M1-stanice

Slika 13: Ovaj točkasti dijagram odnosa HLA-DR i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. HLA-DR izražava se na stanicama koje pokazuju antigene uključujući monocite (zelena) i plazmacitoidne dendritične stanice. Izražava se i na progenitorima pozitivnima na CD34, nezrelim i zrelim B-stanicama te aktiviranim T-stanicama.

Slika 14: Ovaj točkasti dijagramodnosaCD11b i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. CD11b izražava se na granulocitima (plava) i na monocitima (zelena). CD11b izražava se i na NK-stanicama i bazofilima.

Slika 16. Ovaj točkasti dijagramodnosa CD16 i CD13 prikazuje sve vijabilne stanice. CD13 izražava se na granulocitima (plava), monocitima (zelena), bazofilima i progenitorima pozitivnima na CD34. CD16 izražava se na granulocitima u dozrijevanju (plava) i podskupu NK-stanica (crvena, dolje desno).

Slika 15. Ovaj točkasti dijagram odnosa CD11b i CD16 prikazuje sve vijabilne stanice. CD11b izražava se na monocitima (zelena), nezrelim i zrelim granulocitima (plava) i NK-stanicama (crvena). CD16 se izražava na nezrelim i zrelim granulocitima (plava) i na podskupu NK-stanica (crvena, gore desno). Aktivirani zreli monociti izražavaju CD16 u varijabilnoj mjeri i pozitivni su na CD11b.

Sadržaj > Nema imunofenotipske abnormalnosti > Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Svaka je stanica važna

22

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

Epruveta za M1-stanice

Slika 17. Ovaj točkasti dijagramodnosaCD13 i CD34prikazuje sve vijabilne stanice. CD13 izražava se na granulocitima (plava), monocitima (zelena), bazofilima i progenitorima pozitivnima na CD34. CD34 izražava se na ranim hematopoetskim progenitorima. Zreli granulociti, monociti i limfociti negativni su na CD34.

Slika18.OvajtočkastidijagramodnosaCD14 iCD64prikazujesvevijabilnestanice.CD64 se izražava u visokoj mjeri na monocitima (zelena) te u nižoj mjeri na granulocitima (plava). CD14 se izražava u visokoj mjeri namonocitima te u nižoj mjeri na granulocitima (plava). Aktivirani zreli monociti izražavaju CD14 i CD64 u varijabilnoj nižoj mjeri.

Slika 20. Ovaj točkasti dijagram odnosa HLA-DR i CD10 prikazuje sve vijabilne stanice. HLA-DR izražava se na monocitima (zelena), B-stanicama, plazmacitoidnim dendritičnimstanicama i progenitorima pozitivnima na CD34. CD10 izražava se zrelim granulocitima (plava).

Slika 19. Ovaj točkasti dijagramodnosaCD14 i CD16prikazuje sve vijabilne stanice. CD14 izražava se u visokoj mjeri na monocitima (zelena) te u nižoj mjeri na granulocitima (plava, gore lijevo). CD16 izražava se na granulocitima i podskupu NK-stanica (crvena, sredina lijevo). Aktivirani zreli monociti izražavaju CD14 i CD16 u varijabilnoj nižoj mjeri.

Sadržaj > Nema imunofenotipske abnormalnosti > Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Svaka je stanica važna

23

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

Epruveta za M1-stanice

Slika 21. Ovaj točkasti dijagramodnosa CD7 i CD13 prikazuje sve vijabilne stanice. CD7 izražava se na T-stanicama i NK-stanicama (crvena, dolje desno). CD13 izražava se na granulocitima (plava), monocitima (zelena), bazofilima i progenitorima pozitivnima na CD34. Koekspresija CD13 i CD7 obično se ne događa.

Sadržaj > Nema imunofenotipske abnormalnosti > Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Svaka je stanica važna

24

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

Epruveta za M2-stanice

Slika 1: Ovaj točkasti dijagram koji prikazuje odnos ograde Time (Vrijeme) i CD45 je neograđen te sekvencijalno pokazuje sve prikupljene stanice. Ovaj je dijagram namijenjen za procjenu fluidne perturbacije tijekom prikupljanja uzoraka. Stabilno prikupljanje prikazano je ujednačenim uzorkom stanica tijekom vremena. Stanice koje odstupaju od stabilnog uzorka mogu biti isključene u ogradi Time (Vrijeme).

Slika 2: Ovaj točkasti dijagram s odnosom FS INT (Integralna vrijednost prednjeg raspršenja) i FS PEAK (Vršna vrijednost prednjeg raspršenja) prikazuje stanice u ogradi Time (Vrijeme). Ovim se dijagramom isključuju parovi stanica ili agregate. Pojedinačne vrijednosti stanica prikazuju linearan odnos za odnos INT (Integralna vrijednost) i PEAK (Vršna vrijednost) te su uključene u ogradu Singlets (Pojedinačne vrijednosti), dok su parovi stanica izvan linearnog odnosa.

Slika 4: Ovaj točkasti dijagram odnosa CD45 i bočnog raspršenja prikazuje stanice u ogradi Cells (Stanice). Ovimse dijagramomoznačuju različiti podskupovi bijelih krvnih stanica, koji su ograđeni kao stanice pozitivne na CD45. Populacija stanica negativnih na CD45 obično uključuje crvene krvne stanice, agregate trombocita, ostatke tkiva ili nehematopoetske stanice.

Slika3:Ovajtočkastidijagramodnosabočnograspršenja iprednjegraspršenjaprikazuje stanice u ogradi Singlets (Pojedinačne vrijednosti). Ovim se dijagramom isključuju ostaci stanica, koji obično imaju smanjeno prednje raspršenje. Rane apoptotične stanice također imaju blago povećano bočno raspršenje, dok kasne apoptotične i nekrotične stanice imaju varijabilno umanjeno bočno raspršenje. Održive stanice uključene su u ogradu Cells (Stanice).

Sadržaj > Nema imunofenotipske abnormalnosti > Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Svaka je stanica važna

25

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

Epruveta za M2-stanice

Slika 5: Ovaj točkasti dijagram odnosa CD45 i bočnog raspršenja prikazuje stanice u ogradi CD45+. U ovom se točkastom dijagramu razlikuje nekoliko populacija leukocita koji se obično nalaze u uzorcima periferne krvi, koštane srži i limfnih čvorova, uključujući limfocite (ograda Ly, crvena), monocite (ograda Mo, zelena) i granulocite (ograda Gr, plava). Ograda CD45dim (blage ekspresije) (ljubičasta) pokriva područje koje obično zauzimaju mijeloblasti i nezrele B-stanice. U ovo područje mogu spadati i bazofili, plazmacitoidne dendritične stanice, stanice plazme i NK-stanice. Primjenom različitih boja na stanice u svakoj ogradi mogu se pratiti različite populacije stanica tijekom analize.

Slika 6: Ovaj točkasti dijagramodnosa CD15 i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. CD15 izražava se na granulocitima (plava) i u nižoj mjeri namonocitima (zelena).

Slika 8: Ovaj točkasti dijagramodnosa CD117 i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. CD117 se izražava varijabilno na mijeloidnim progenitorima pozitivnima na CD34, ranim promijelocitima, ranim eritroidnim prekursorima, te u visokoj mjeri na mastocitima. CD117 se također izražava na podskupovima reaktivnih NK-stanica i neoplastičnih stanica plazme. Zreli granulociti, monociti i limfociti negativni su na CD117.

Slika 7: Ovaj točkasti dijagram odnosa CD123 i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. CD123 izražava se u visokoj mjeri na bazofilima i plazmacitoidnim dendritičnim stanicama te u nižoj mjeri na mijeloidnimprogenitorima pozitivnima na CD34 i monocitima (zelena).

Sadržaj > Nema imunofenotipske abnormalnosti > Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Svaka je stanica važna

26

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB

Epruveta za M2-stanice

Slika 9: Ovaj točkasti dijagramodnosa CD13 i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. CD13 izražava se na granulocitima (plava) i na zrelim monocitima (zelena) i varijabilno na mijeloidnim progenitorima.

Slika 10: Ovaj točkasti dijagramodnosaCD33 i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. CD33 izražava se u visokoj mjeri na monocitima (zelena) te u nižoj mjeri na granulocitima (plava). CD33 također se izražava na bazofilima, podskupu NK-stanica (crvena) i podskupu mijeloidnih progenitora pozitivnih na CD34.

Slika 12: Ovaj točkasti dijagram odnosa CD38 i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. CD38 je aktivacijski biljeg. Izražava se u najvišoj mjeri na stanicama plazme, u umjerenoj mjeri na nezrelim mijeloidnim i limfoidnim progenitorima, u niskoj mjeri na monocitima (zelena) te u varijabilno niskoj mjeri na aktiviranim zrelim limfocitima (crvena).

Slika 11: Ovaj točkasti dijagram odnosa CD34 i bočnog raspršenja prikazuje sve vijabilne stanice. CD34 biljeg je ranih hematopoetskih progenitora. Obično se izražava na mijeloidnim blastima, nezrelim B i T-stanicama (limfoblastima). Zreli granulociti, monociti i limfociti negativni su na CD34. Progenitori pozitivni na CD34 obično predstavljaju manje od 0,01 % leukocita u perifernoj krvi.

Sadržaj > Nema imunofenotipske abnormalnosti > Slučaj br. 1: Normalna puna krv

Svaka je stanica važna

27

Beckman Coulter • Paneli ClearLLab 10C • C33365 AB